基因表現與分析
報導基因表現分析 (Reporter
Gene Analysis)
Secreted Alkaline Phosphatase Assay System
( SEAP )
Phospha-Light Secreted Alkaline Phosphatase
Reporter Gene Assay System
Phospha-Light 冷光報導基因試劑可以靈敏地偵測分泌性鹼性磷酸 (SEAP),作為報導基因的
分泌性鹼性磷酸 是修改過的人類胎盤鹼性磷酸 。SEAP會分泌到細胞培養基中,然後取一部分
培養基來做試驗。分泌性的報導基因讓你不需為了取得細胞抽取物破壞樣本細胞,因此可以多次
取樣或是保留細胞供進一步的實驗使用。Phospha-Light 是你最佳化轉殖效率最簡單迅速的選擇
。結合本公司數種專利的藥品是Phospha-Light 擁有高敏感度的關鍵,本試劑含有CSPD高效能鹼
性磷酸 受質,Emeraldx
冷光增強劑,和特別設計的緩衝液可以抑制胎盤鹼性磷酸 以外內生
性的鹼性磷酸 活性。持續發光的冷光信號讓您的冷光儀不需要用自動分注器協助。
產品特性:
•以分泌性蛋白作為報導基因,不用毀掉珍貴的細胞
•利用鹼性磷酸 的大變動範圍,可以精確測得fg到ng數量級的酵素
•High Sensitivity:敏感度是放射性或非放射性chloramphenicol acetyl transferase
(CAT) 或顯色法及
螢光法測量的百倍到千倍
•Wide Linear Range:即使遇上表現量特別高或特別低的樣本時也不需要稀釋或濃縮
•Non-radioisotope:不用顧慮使用放射同位素的麻煩
•High Speed:可在一小時內快速完成試驗
實驗步驟:
1. Seed cells and treat or culture as desired
2. Transfer cell culture supernatant samples to luminometer microplate
wells
3. Add Dilution Buffer
4. If culture media contains serum, seal wells and incubate plate
for 30 min. at 65℃, then cool to room temperature.
5. Add Assay Buffer and incubate 5 min.
6. Add Substrate Solution and incubate 30 min.
7. Place plate in luminometer and measure SEAP light emission.
試劑組內容物:
•CSPD chemiluminescent substrate
•Phospha-Light Reaction Buffer Dilute with Emerald enhancer
•Phospha-Light Assay Buffer
•5X Dilution Buffer
•Positive Control Alkaline Phosphatase
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